====== Epe hatása a lipáz enzimaktivitására ======

<WRAP center round download 20%>
{{:aok:biokemia:masodik_felev:lipaz.pdf|gyakorlati jegyzet letöltése (pdf)}}
</WRAP>

===== Lipidemésztés, a lipáz-aktivitás mérése =====

  * Az élőlényekben a glicerinészter-hidrolázok (**lipázok**) hasítják a neutrális zsírokat glicerinre és zsírsavakra.
  * triglicerid + H<sub>2</sub>O -> diglicerid + zsírsav

==== pancreas-lipáz ====

  * emberben a legfontosabb enzim a lipidek emésztésében
  * a pancreas termeli
  * a duodenumba jutva a trigliceridekből zsírsavakat szabadít föl.
  * aktív lúgos, neutrális és savas közegben is.
  * működését az epesavak segítik elő.

==== epesavak ====

  * amfipatikusak -> emulgeálják a zsírokat
  * a lipázt direkt aktiválják -> ez a hatás vizsgálható tejben (ahol a zsírok eleve finom emulzió formájában találhatók)

==== a gyakorlat ====

  * a lipáz aktivitását a fölszabaduló zsírsavak (gyenge savak) fenolftalein(savas: színtelen, lúgos: piros) indikátor melletti titrálásán keresztül vizsgáljuk.

=== anyagok ===
  * tej (2,8% zsírtartalom) (pH=7,2)
  * 10%-os formaldehid oldat
  * lipáz oldat
  * fenolftalein
  * epe
  * 0,1 N NaOH oldat

=== Hagedorn-csövekben készítsük össze az alábbi rendszereket ===

|anyagok|1. rendszer|2. rendszer|
|tej(ml)|50|50|
|epe (ml)|-|2|
|desztillált víz (ml)|2|-|
|lipáz (ml)|2|2|

  * az inkubációt (37 <sup>o</sup>C-on a lipáz hozzáadásával indítjuk.
  * Az inkubálás 0., 10., 20., és 40. percében  mindegyik Hagedorn-csőből 10-10 ml mintát veszünk
  * ezeket Erlenmeyer-lombikba pipettázunk 10 ml formaldehidet  és 2-3 csepp fenolftaleint adunk hozzájuk
  * ezt követően ezen oldatokat 0,1 N Na-hidroxiddal megtitráljuk.
  * A titráláshoz fogyott NaOH mennyiségét koordináta rendszerben ábrázoljuk az inkubációs idő függvényében. 

{{ :aok:targyak:biokemia_molekularis_es_sejtbiologia:tetel:lipaz_epe.png |}}